\ . .,, MIL–STO-81 OB . Downloaded from https://www.everyspec.com 15 June 1967 . . Fund A7CC NI.ABS li q u i d . R e s u s p e n d t h e r e s i d u e i n 50 m l . of A spergiUta nioer 9642 No. , N o . x 386 s t e r il e w a t e r a n d c e n t r i f u g e . A spwgilltu flavtw 9643 380 W a s h t h e s p o r e s o b t a i n e d f r o m e a c h of t h e f un g i i n t h i s m a nn e r t h r ee t i m e s .
D il u t e A spe,gitk w.rsicotor 11730 432 t h e f i n a l w a s h e d r e s i d u e w i t h s t e r il e m i n e r a l - s a l t a s o l u t i o n i n s u c h a m a nn e r t h a t t h e r e - Peni.illiwn funictilomtm 9644 391 s u l t a n t s p o r e s u s p e n s i o n s h a ll co n t a i n , American TYTC Culture Cblledkm, 12301 P.rkl.wn Drive, Rmknll., Maryland 20852 , Pim,-fig R~carch Division, U,S. Amy N.tick I,nbnratwics, Natick. Msssacl,usetk 01760 Chaetmnium globoaum 6205 459 1,000,000 & 200,000 s p o r e s p e r m l . a s d e - t e r m i n e d w i t h a co un t i n g c h a m b e r .
( R e p e a t t h i s o p e r a t i o n fo r e a c h o r g a n i s m M a i n t a i n c u l t u r e s of t h e s e f un g i s e p a r a t e l y o n a n a pp r o p r i a t e m e d i u m s u c h a s p o t a t o u s e d i n t h e t e s t a n d b l e n d e q u a l v o l u m e s of t h e r e s u l t a n t s p o r e s u s p e n s i o n t o o b t a i n t h e f ii r a l m i x e d s p o r e s u s p e n s i o n . d e x t r o s e a g a r .
H o w e v e r , t h e c u l t u r e of s t r i p s of f il t e r p a p e r o n t h e s u r f a c e of m i n - C k m t o m i w n globosum s h a ll b e c u l t u r e d o n T h e s p o r e s u s p e n s i o n m a y b e p r e p a r e d f r e s h e a c h d a y o r m a y b e h e l d a t 6 & 4 ° C ( 43 ° F ) fo r n o t m o r e t h a n 4 d a y s . i d e n t i c a l t u m i n e r a l s a l t s s o l u t i o n d e s c r i b e d e r a l s a l t s a g a r . ( M i n e r a l s a l t a a g a r i s i n 3.1.1, b u t co n t a i n s i n a dd i t i o n 15.0 g of k e p t fo r not m o r e t h a n 4 m o n t h s a t 6 - + 4 ° C ( 43 F ) .
U s e s u b c u l t u r e s i n c u b a t e d a t 29 ° C ( 84 F ) fo r 7 t a 20 d a y s i n p r e p a r i n g t h e a g a r p e r li t e r . ) T h e s t oc k c u l t u r e s m a y b e e a c h d a il y g r o u p of t e s t s p l a c e e a c h of t h r ee 3.1.3 Viabikty of i r w c u l u m co n t r o l . W i t h p i e c e s of s t e r ili z e d f il t e r p a p e r , 1 i n . s q u a r e , o n h a r d e n e d m i n e r a l - s a l t s a g a r i n s e p a r a t e , s p o r e s u s p e n s i o n . P e t r i d i s h e s . I n oc u l a t e t h e s e w i t h t b e s p o r e :
P r e p a r e a s p o r e s u s p e n s i o n of e a c h of t h e f i v e f un g i b y p o u r i n g i n t o o n e s u b c u l t u r e of a s t e r ili z e d a t o m i z e r l s o t h a t t h e e n t i r e s u r - f a c e i s m o i s t e n e d w i t h t h e s p u r e s u s p e n s i o n . s u s p e n s i o n b y s p r a y i n g t h e s u s p e n s i o n f r o m I n c u b a t e t h e s e a t 29 C ( 84 F ) a t a r e l a t i v e . e a c h f un g u s a s t e r il e I O - m l p o r t i o n of w a t e r o r of a s t e r il e s o l u t i o n co n t a i n i n g 0.05 g p e r hu m i d i t y n o t l e ss t h a n 85 p e r c e n t a n d e x - s o d i u m d i oc t y l s u l fo s u cc i n a t e .
U s e a s t e r il e li t e r of a n o n t o x i c w e tt i n g a g e n t s u c h a s s h a ll b e co p i o u s g r o w t h o n a ll t h r ee of t h e f il t e r p a p e r co n t r o l s p e c i m e i m ,. A b s e n c e of s u c h g r o w t h r e q u i r e s r e p e t i t i o n of t h e t e s t . a m i n e t h e m a f t e r 14 d a y s i n c u b a t i o n . T h e r e s c r a p e g e n t l y t h e s u r f a c e g r o w t h f r o m t h e c u l t u r e of t h e t e s t o r g a n i s m . P o u r t h e s p o r e c h a r g e i n t o a s t e r il e 125 - m l g l a ss - s t o pp e r e d p l a t i nu m or. n i c h r o m e i n oc u l a t i n g w i r e t o , D.Vilbu, N..
154 .tmnizer ., ewivalmt has bcm found ,a,.,r.ctory for this p“lpose. E r l e n m e y e r f l a s k co n t a i n i n g 45 m l . of s t e r il e i n d i a m e t e r . S h a k e t h e f l a s k v i g o r o u s l y t o w a t e r a n d 10 t o 15 s o li d g l a ss b e a d s , 5 mm . v i a b ili t y of i n oc uh l m co n t r o l , a nu m b e r of 3. I .4 C O n t r oZ itern.s. I n a dd i t i o n t o t h e li b e r a t e t h e s p o r e s f r o m t h e f r u i t i n g b o d i e s k n o w n s u s c e p t i b l e s u b s t r a t e s s h a ll b e i n oc u - l a t e d a l o n g w i t h , t h e t e s t i t e m t o i n s u r e t h a t a n d t o b r e a k t h e s p o r e c l u m p s .
p r o p e r co n d i t i o n s a r e p r e s e n t i n t h e i n c u b a - t i o n c h a m b e r t o p r o m o t e f un g u s g r o w t h . T h c co n t r o l i t e m s s h a ll i n c l u d e t h r ee p i e c e s e a c h of p r e s e r v a t i v e f r ee v e g e t a b l e t a nn e d l e a t h e r a n d p r o t e i n - g l u e bonded co r k . F il t e r t h e s h a k e n s u s p e n s i o n t h r o u g h a t h i n l a y e r of s t e r il e g l a ss W OO ] i n a g l a ss f unn e l i n t o a s t e r il e f l a s k i n o r d e r t o r e m o v e m y c e I i a l f r a g m e n t s .
C e n t r i f u g e t h e t ii t e r e d s p o r e s u s p e n s i o n a s e p t i c a ll y , a n d d i s c a r d t b e s u p e r n a t a n t 3.1.5 Inocufntion of test a n d control items. (a) M o un t t h e t e s t a n d co n t r o l i t e m s o n M E T H OD 508 50 % 2 ‘~,.. ! l -_ .. . ... . . .. . ... . .. .. .. . . . . . . . ...... . . . . . . . .